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聚乙烯膜片的质量变化按照下述流程处理:用2% SDS溶液振荡洗涤聚乙烯膜片4 h,超声15 min,去除表面的生物膜,再用无菌水洗涤膜片3次,将洗涤后的聚乙烯膜片放置在干燥器中干燥48 h后称重。
聚乙烯的质量衰减率(%)=(聚乙烯初始质量-降解后质量)/初始质量×
聚乙烯膜片表面官能团的测定采用傅里叶红外光谱仪进行测定,清洗干净的膜片自然干燥后测定。扫描波长范围600-4000 cm-1,分辨率4 cm-1,扫描次数32次。
在扫描电镜下观察到接菌处理的膜片与对照组相比表面粗糙,边缘出现了崩解,表面出现明显的微生物侵蚀孔洞。并且由图5可见,经接触角测量仪结果显示,接菌处理的聚乙烯膜片水接触角为74.4±0.3°,远低于对照处理93.5±2.4°,表明接菌处理显著降低了PE薄膜的疏水性,更易于被微生物附着侵蚀。同时由图6中FTIR结果显示,降解后PE薄膜出现了新的特征峰,在1716 cm-1 测到了羰基峰。羰基 [-C=O-键](1720cm-1左右)的出现是PE发生生物降解的基本标志,表明聚乙烯发生了生物降解。而后继续按照上述培养方式培养至60 d后,接种MP-1处理的膜片质量降低了4.37±0.66%,而对照处理未发生变化,表明利用MP-1降解了聚乙烯。
尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明,但本领域的普通技术人员应当理解:其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改,或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换;而这些修改或者替换,并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围。
将MP-1按2-5%的接种量接种至LB培养基中培养至对数生长期,用0.01 mol/L磷酸盐缓冲溶液洗涤3遍去除表面的培养基,之后再用无碳源矿物盐培养基重悬,而后调节重悬菌液OD600值为1.0。聚乙烯膜片裁剪成2×2 cm2大小,称重后用75%的乙醇灭菌2 h,取出后在超净台中用无菌气流挥发掉表面的乙醇。锥形瓶中加入90 mL无碳源矿物盐培养基,加入表面灭菌的聚乙烯膜片(2 g/L),以10%(v/v)的接种量接种上述MP-1重悬菌液。以不接菌处理为对照组,每种处理设置3个平行样。将锥形瓶放置于恒温震荡培养箱中28 ℃、180 r/min培养,定期取样分析聚乙烯膜片表面的形貌变化、官能团变化、质量损失及疏水性变化(参见图4)。
聚乙烯膜片表面微观形貌变化按照如下流程处理:用无菌水冲洗表面多余的培养基,用2.5%戊二醛固定2 h,再依次用30%、50%、70%、90%、乙醇梯度脱水,每次15 min,再用叔丁醇置换2次,每次30 min。将处理好的样品干燥,固定喷金后在扫描电子显微镜(Hitachi S-4800 FE-SEM,日立)下观察其微观形貌特征。